Amy Sedaris växte upp i North Carolina. Hon studerade och uppträdde vid improvisationsteatern Second City i Chicago och lever idag i New York, där hon medverkat i en rad teaterpjäser. Sedaris är främst känd från tv, där hon utöver Exit 57 och Strangers with Candy medverkat i serier som Sex and the city, Just shoot me och Law & Order: SVU. Sedaris gör dessutom regelbundna insatser i Late Show with David Letterman.

Sedaris har medverkat i filmer som Nora Ephrons En förtrollad romans (2005), John Turturros Romance & Cigarettes (2005), Wayne Wangs Kärleken checkar in (Maid in Manhattan, 2002), Richard Linklaters School of rock (2003), John Favreaus Elf (2003) och senast i David Gordon Greens (Undertow), kommande film Snow Angels där hon spelar mot bland andra Kate Beckinsale, Griffin Dunne, Tom Noonan och Sam Rockwell.