Efter att ha tagit examen vid prestigefyllda Tisch School of the Arts och Juilliard School of Drama, medverkade Lisa Gay Hamilton i ett flertal teateruppsättningar innan hon på 90-talet började synas på tv i serier som Uppdrag mord (Homicide: Life on the Streets), Law & Order, Ally McBeal och kanske framförallt i David E. Kellys Advokaterna.

Tidiga filmroller gjorde Lisa Gay Hamilton i Palookaville (1995, regi Alan Taylor), De tolv apornas armé (Twelve Monkeys, 1998, regi Terry Gilliam), Jackie Brown (1997, regi Quentin Tarantino), och mot Oprah Winfrey, Danny Glover och Thandie Newton i Jonathan Demmes Älskade (Beloved, 1998). Gay Hamilton har även kunnat ses i tv-serier som The L Word och Sex and the City.